由于同源重組修復(fù)與非同源末端連接相比發(fā)生頻率較低，所以科學(xué)家開(kāi)發(fā)了用于單堿基編輯的系統(tǒng)。該單堿基編輯系統(tǒng)不需要誘導(dǎo)DNA雙鏈斷裂，也不需要加入DNA修復(fù)模板即可實(shí)現(xiàn)位點(diǎn)單堿基的改變。該技術(shù)已成功地應(yīng)用于多種單子葉植物和雙子葉植物，如小麥、水稻、玉米、擬南芥和番茄等。
CRISPR單堿基編輯系統(tǒng)包含一個(gè)失活的Cas9（dead Cas9，dCas9）或僅可造成缺口的Cas9（Cas9 nickase，nCas9）和胞苷脫氨酶或腺嘌呤脫氨酶。胞嘧啶堿基編輯系統(tǒng)（cytidine base editors，CBEs）可將胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ぃ║），尿嘧啶隨后通過(guò)DNA復(fù)制或修復(fù)的方式轉(zhuǎn)變?yōu)樾叵汆奏ぃ═）。類似地，腺嘌呤堿基編輯系統(tǒng)（adenine base editors，ABEs）可將腺嘌呤（A）轉(zhuǎn)變?yōu)榧≤眨↖），然后轉(zhuǎn)變?yōu)轼B(niǎo)嘌呤（G），從而實(shí)現(xiàn)A到G的轉(zhuǎn)換。
圖1. 具代表性的胞嘧啶（左）和腺嘌呤（右）單堿基編輯系統(tǒng)（Eid et al., 2018）。
公司優(yōu)勢(shì)：
技術(shù)熟練，服務(wù)周期短、質(zhì)量高。
有許多系統(tǒng)可選：
可提供多種Cas9變體，如SpCas9、SaCas9、SpVQR-Cas9、SpEQR-Cas9、SpVRER-Cas9和SaKKH-Cas9，它們具有不同的PAM識(shí)別位點(diǎn)。
可提供編輯窗口窄且脫靶效率低的單堿基編輯系統(tǒng)。
可提供TAM和CRISPR-X系統(tǒng)，它們可以分別將C轉(zhuǎn)變成A、G或T，和將G轉(zhuǎn)換為A、C或T。
可以提供進(jìn)行mRNA編輯的CRISPR/Cas13系統(tǒng)。
北京安必奇生物可以為客戶提供單堿基編輯服務(wù)，包括載體構(gòu)建和轉(zhuǎn)化，以及隨后的基因功能分析。我們與國(guó)內(nèi)外公司具有合作，可以在基因編輯和轉(zhuǎn)基因技術(shù)方面提供解決方案。如有任何相關(guān)問(wèn)題，可隨時(shí)聯(lián)系我們的工作人員，我們盡快為您解答和服務(wù)！
實(shí)驗(yàn)流程：
參考文獻(xiàn)
Eid, A.; et al. (2018).CRISPR base editors: genome editing without double-stranded breaks. Biochemical Journal, 475 (11), 1955-1964.
