基因工程技術(shù)，特別是CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)，提高了科學(xué)家進(jìn)行基因組編輯的能力。然而，人們經(jīng)常擔(dān)心轉(zhuǎn)基因食品的安全性。因此，科學(xué)家開(kāi)發(fā)了DNA-free的基因組編輯方法。目前，DNA-free基因編輯方法不僅得到了學(xué)術(shù)界廣泛的關(guān)注，還得到了工業(yè)界的青睞。
北京安必奇生物可提供多種DNA-free的植物基因組編輯方法，可幫助實(shí)現(xiàn)更安全的植物轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品。這些技術(shù)包括瞬時(shí)表達(dá)CRISPR/Cas9質(zhì)粒DNA（transiently expressed CRISPR/Cas9 plasmids DNA，TECCDNA） （圖1）、體外轉(zhuǎn)錄CRISPR/Cas9 （in vitro transcripts，IVTs）以及由純化好的Cas9蛋白和sgRNAs組成的預(yù)組裝核糖核酸復(fù)合物（ribonucleoprotein， RNPs）（圖2）。這些技術(shù)可以避免外源DNA與基因組的整合，并可以減少脫靶效應(yīng)。此外，與傳統(tǒng)的技術(shù)相比，這些技術(shù)可避免用雜交或回交來(lái)分離CRISPR/Cas9嵌合體，因此更便宜、實(shí)驗(yàn)周期更短。
圖 1. 瞬時(shí)CRISPR/Cas9 DNA 編輯技術(shù)（Zhang et al., 2016）。
圖 2. DNA-free植物CRISPR/Cas9 RNAs體外轉(zhuǎn)錄和RNP技術(shù)（Yin et al., 2017）。
我們可提供方法將TECCDNA、IVTs和RNPs 轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞，主要有聚乙二醇(PEG)、陽(yáng)離子脂質(zhì)和/或電穿孔介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化和基因槍介導(dǎo)的未成熟胚轉(zhuǎn)化（圖1和2）。該技術(shù)運(yùn)用到擬南芥、煙草、生菜、水稻和小麥等物種。我們擁有的專家，可以為客戶提供從TECCDNA、IVTs和RNPs的制備到突變篩選的服務(wù)。如需進(jìn)一步的信息，請(qǐng)隨時(shí)與我們的工作人員聯(lián)系。
參考文獻(xiàn)：
1. Zhang Y.; et al. Efficient and transgene-free genome editing in wheat through transient expression of CRISPR/Cas9 DNA or RNA. Nature Comm. 2016, 7: 12617.
2. Yin K.; et al. Progress and prospects in plant genome editing. Nature Plants. 2017, 3: 17107.