原位雜交技術(shù)（In situ hybridization，ISH）是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列，將有放射性或非放射性的外源核酸（即探針）與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對，結(jié)合成核酸雜交分子，經(jīng)檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。
熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization, FISH）則是在放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術(shù)，以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記的原位雜交方法，是利用熒光標(biāo)記的DNA探針來檢測在細胞、組織和腫瘤的特定DNA序列的分子診斷技術(shù)。首先將樣本DNA變性，加入特定的熒光標(biāo)記的探針與變性的樣本混合進行雜交，退火得到雙鏈DNA。探針信號能夠被熒光顯微鏡捕獲，從而定性、定量地檢測目標(biāo)DNA。與其它用于研究染色體的技術(shù)不同，F(xiàn)ISH操作靈活，不需要在正在分裂的細胞進行檢測，因而能夠用來檢測基因或染色體是否異常，通常用于遺傳咨詢，醫(yī)學(xué)和品種鑒定、DNA特定功能研究。利用FISH方法還可檢測非整倍體，微缺失綜合征以及基因重排等，這些指標(biāo)對遺傳性疾病，如白血病，淋巴瘤，實體瘤，自閉癥等發(fā)育綜合征有重要的臨床意義。
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我們?yōu)槎鄠€FISH應(yīng)用建立了實驗方案以增強靈敏度和信號，包括：
? 細胞染色體FISH（間期，中期和培養(yǎng)的細胞）；
? 組織染色體FISH（福爾馬林固定的、石蠟包埋組織切片或細胞玻片）；
? RNA-FISH（細胞內(nèi)RNA定位，RNA加工，定量）。
? 探頭設(shè)計、標(biāo)記及純化：利用技術(shù)，我們設(shè)計了具有靈敏度和特異性探針，并提供多種標(biāo)記以供選擇。
? 雜交：在定制優(yōu)化雜交條件方面，我們具有經(jīng)驗。
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