蛋白質的磷酸化修飾是生物體內重要的共價修飾方式之一。磷酸化修飾本身所具有的簡單、靈活、可逆的特性，以及磷酸基團的供體ATP的易得性，使得磷酸化修飾被真核細胞所選擇接受成為一種普遍的調控手段。蛋白質的磷酸化和去磷酸化這一可逆過程，幾乎調節著包括細胞的增殖、發育、分化、細胞骨架調控、細胞凋亡、神經活動、肌肉收縮、新陳代謝及腫瘤發生等生命活動的過程，并且可逆的蛋白質磷酸化是目前所知道的主要的信號轉導方式。目前已經知道有許多人類疾病是由于異常的磷酸化修飾所引起，而有些磷酸化修飾卻是某種疾病所導致的后果。

技術路線

技術優點

• 全面性：磷酸化蛋白質組學以整個細胞蛋白為研究對象，研究內容包括了細胞內具有生命功能的蛋白，如細胞增生、細胞分裂和細胞分化等相關蛋白，因而研究更為全面。

• 可靠性：傳統的生物學研究蛋白質磷酸化往往針對特定條件，以兩個蛋白或更多蛋白之間的相互作用為出發點，具有局限性，缺乏整體認識。磷酸化蛋白質組學則可檢測不同蛋白激酶及磷酸化酶對同一個蛋白磷酸化程度的影響，因而結果具有普遍性和可靠性。

• 有效性：磷酸化蛋白質組學反映的是細胞內真實發生的事件，在一次試驗中考慮了不同變量，克服了生物學中逐步添加變量的缺陷。

• 探索性：磷酸化蛋白質組學以細胞內蛋白為研究對象，相對于傳統的生物學研究以及蛋白質芯片，更易發現未知的新磷酸化位點和磷酸化蛋白質。如果可以聯合生物學技術，則可以發現具有磷酸化或者去磷酸化功能的酶。

技術平臺

Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion? Tribrid?

樣品要求

• 組織樣品：動物、微生物組織濕重> 30mg; 植物新鮮組織> 300mg。

• 細胞樣本：細胞量> 10⁷。

• 體液樣本：血清體積> 1500 μL。

• 蛋白質提取物：蛋白質總量>900μg，并且濃度> 1μg/μL。