膠點鑒定
對于較純或者單一的蛋白樣品，我們采用MALDI-TOF蛋白鑒定技術進行蛋白鑒定。除銀染的蛋白質膠帶樣品之外，我們可以對可見的蛋白質膠帶進行鑒定。
技術原理
基質輔助激光解吸附質譜技術（Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization Time Of Flight ）的基本原理是將分析物分散在基質分子中并形成晶體，當用激光照射晶體時，由于基質分子經輻射所吸收的能量，導致能量蓄積并產熱，從而使基質晶體升華，致使基質和分析物膨脹并進入氣相。離子在電場作用下加速飛過飛行管道，根據到達檢測器的飛行時間不同而被檢測，即測定離子的質荷比（M/Z）與離子的飛行時間成正比，從而檢測離子。MALDI所產生的質譜圖多為單電荷離子，因而質譜圖中的離子與多肽和蛋白質的質量有一一對應關系。
MALDI-TOF質譜原理示意圖 技術流程 
技術特點
適合較純的樣品，樣品簡單，容易檢測；
目標性強，速度快，通量高。
樣本要求
雙向凝膠膠點：考染、銀染（質譜兼容）點清晰可見；
SDS-PAGE膠條：考染、銀染（質譜兼容）條帶清晰可見，單一蛋白質，純度>90% ；
蛋白質溶液：單一蛋白質，純度>90%。
技術平臺
ABI 4800 MALDI-TOF/TOF
案例解析
高糖通過不同途徑干擾胰島素分泌細胞功能的蛋白質組學研究
慢性高血糖會導致β細胞的功能紊亂并誘導其加速滅亡，是2性糖尿病的一個主要指標。本研究以INS-IE細胞以及其在25mM葡萄糖處理下的兩組細胞為研究對象，通過雙向電泳（2D）實驗尋找到100個顯著性差異表達蛋白質。通過MALDI-TOF對這些差異蛋白質點進行鑒定后發現，高糖組是通過伴侶蛋白、蛋白質合成以及遍在蛋白等途徑來擾亂細胞的正常生理功能，這些發現通過后續的功能檢測試驗得到驗證。
參考文獻
Bahr U, Deppe A, Karas M, et al. Mass spectrometry of synthetic polymers by UV-matrix-assisted laser desorption/ionization[J]. Analytical chemistry, 1992, 64(22): 2866-2869.
M Maris et al. High Glucose Induces Dysfunction in Insulin Secretory Cells by Different Pathways: A ProteomicApproach. J. Proteome Res., 2010, 9 (12), pp 6274–6287.
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