

細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖,通過分裂,可以將復制的遺傳物質,平均地分配到兩個子細胞中去,是生物體生長、發育、繁殖和遺傳的基礎。單細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的細胞,用來補充體內衰老和死亡的細胞;同時,多細胞生物可以由一個受精卵,經過細胞的分裂和分化,最終發育成一個新的多細胞個體。
細胞增殖檢測的準確方法之一,就是直接測定DNA的合成,同時也是測定物質毒性、評估藥物安全、細胞健康的基本方法。通過檢測細胞增殖活性,可以指示腫瘤細胞增殖活性、目的基因瞬轉/穩轉細胞系的細胞增殖活性,在小分子化合物/多肽等藥物篩選及功能安全性研究、中藥/中間體等藥物篩選及功能安全性研究、目的基因過表達的基因功能研究、目的基因RNAi干擾的基因功能研究中發揮重要作用。
北京安必奇生物能夠提供細胞增殖及活性檢測服務。目前常用的細胞增殖檢測方法包括胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)滲入法、MTT檢測法、CFSE檢測法、Brdu檢測法、EdU檢測法以及CCK8檢測法。安必奇生物主要采用CCK-8法檢測細胞增殖。
實驗流程
CCK-8(Cell Counting kit-8)試劑中含有2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽(WST–8),其在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下,被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產物(Formazan)。因生成的甲臜物的數量與活細胞的數量成正比,因此可采用酶標儀在450nm波長處測定其光吸收值,從而間接反映活細胞數量。
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