細(xì)胞免疫熒光是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素制成熒光標(biāo)記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。在細(xì)胞或組織中形成的抗原抗體復(fù)合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標(biāo)本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細(xì)胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位,以及利用定量技術(shù)測定含量。
安必奇生物的分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué)產(chǎn)品,實驗條件,設(shè)備,實驗人員,助力您的實驗完成。
技術(shù)流程

細(xì)胞爬片:將細(xì)胞按20%-30%的匯合度接種到24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中的圓形蓋玻片上。
細(xì)胞固定:4%冷的多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。
細(xì)胞通透:Triton X-100 通透20分鐘,PBS洗三遍。
封閉:用與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,PBS洗三遍。
一抗孵育:一抗4度濕盒內(nèi)過夜,也可37度2小時,PBS洗三遍。
二抗孵育:二抗室溫孵育2小時或者37度1.5小時(避光),PBS洗三遍。
DAPI染核:在二抗孵育1小時后加入終濃度為100ng/ml的DAPI繼續(xù)孵育。然后可在熒光顯微鏡下觀察或直接封片保存。
甘油封片:在載玻片上滴一小滴甘油,小心地將細(xì)胞爬片從細(xì)胞培養(yǎng)板中取出來,種植有細(xì)胞的一面朝下輕輕的蓋在甘油上,避免產(chǎn)生過氣泡。4度孵育過夜晾干。
服務(wù)流程
? 根據(jù)客戶所需要目的蛋白和提供的一抗,進行預(yù)實驗驗證一抗的效價。
? 目的蛋白和一抗二抗孵育顯色。
? 提供實驗報告:包括詳細(xì)的實驗方法及實驗結(jié)果的相關(guān)圖表。
交付結(jié)果
完整的實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑和相關(guān)分析數(shù)據(jù)
詢價及訂購
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