小鼠單克隆抗體簡介:
單克隆抗體是由激活的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合而成的單克隆雜交瘤細胞產生的。小鼠單克隆抗體是常見的單克隆抗體。同時小鼠也是生物學和醫學領域中常見的模式動物之一。
· 高度特異性
· 高度均一性
· 可快速、大量、連續生產
· 應用領域廣泛,涵蓋檢測治療等多個領域
· 制備方案和工具成熟
· 應用前景良好
安必奇的優勢:
· 節省寶貴時間
· 新型佐劑MagicTM免疫佐劑,僅需21天即可引起免疫效應
· 陽性雜交瘤細胞的篩選平臺----Omni-HybridomaTM platform
· MagicTM hybridoma growth factor提高細胞融合成功率存活率,使抗體穩定表達
我們的小鼠單克隆抗體:
· pM級的親和性和高特異性
· 對多種抗原均有效果
· 可以識別區分轉錄后修飾(PTM)
· 適用于甲醛固定的免疫組化
· 可大量制備具有生物活性的抗體
服務具體內容:
可使用小分子、多肽、修飾多肽、蛋白、融合蛋白、修飾蛋白等作為抗原進行單克隆抗體制備。同時,我們也提供抗原制備服務,包括DNA合成、質粒構建、蛋白表達、蛋白純化、蛋白修飾、多肽合成、多肽修飾、多肽與載體蛋白交聯、小分子結構分析及與載體蛋白交聯等。如客戶需要,我們還提供抗體提純及抗體鑒定服務。
(所涉及轉錄后修飾一般包括:磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化修飾等)
小鼠單克隆抗體制備流程:
步驟 | 服務內容 | 周期 |
| 1. 動物免疫 | 1. 免疫5只小鼠,進行2-3次免疫; 2. 采集5只小鼠血清,分別做ELISA檢測; 3. 提供鑒定報告。 | 4-6周 |
| 2.雜交瘤制備 | 效價合格后,經客戶同意后,進行融合實驗: 1. 選取血清效價高的小鼠的取脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合。 2.有限稀釋融合細胞,96孔板克隆化; 3. HAT篩選雜交瘤細胞; 4. 免疫原檢測,檢測出抗原陽性1-10個陽性細胞,擴大培養至48孔板; 5. 挑取陽性克隆擴增,微量-80度凍存細胞【凍存細胞可保存1年以上】; 6. 提供客戶1ml上清/陽性克隆,供客戶檢測,檢測結果20天內反饋。 客戶根據自己的ELISA檢測、功能檢測結果,挑選陽性克隆;丟棄其余克隆。如果客戶需要保存其余克隆,需要提前溝通,另行約定費用和保存方式。 | 4-6周 |
| 3.亞克隆 | 根據客戶的要求,選取陽性克隆進行亞克隆: 1. 每個克隆做96孔板有限稀釋培養,ELISA篩選陽性亞克隆; 2. 陽性克隆擴增,少量-80度凍存細胞; 3. 提供1ml雜交瘤細胞上清,供客戶進行檢測;檢測結果請在20天內反饋。 套餐中包括總共不超過3個陽性亞克隆細胞,默認根據結果好的3個陽性亞克隆,放大至T-25 Flask培養,ELISA再次確認后進行細胞凍存,每個亞克隆凍存3管細胞。 | 1-3周 |
| 4. 腹水制備(可選) | 1. 客戶選取的雜交瘤細胞制備腹水,免疫2只小鼠,Protein A純化腹水,ELISA檢測效價; 2. 提供純化后雜交瘤細胞,<5mg/clone; 3. 提供實驗報告和剩余腹水抗體; 注:亦可選擇細胞上清純化。 | 1-3周 |
| 5. 套餐外陽性雜交瘤細胞的選取(可選) | 套餐(3個亞克隆)之外的其它備選細胞, 若客戶需要亞克隆,每額外增加一個亞克隆, 需要額外支付的費用。 | N/A |
| 6.抗體配對(可選) | 1.若干株陽性單抗兩兩組合,進行夾心ELISA實驗; 2.根據夾心ELISA實驗結果挑選配對抗體; 3.出具相關的檢測報告提供給客戶。 | 2-4周 |
| 7.功能驗證(可選) | 可以根據客戶對抗體的要求進行ELISA、WB等實驗的檢驗驗證,確定制備獲得的抗體是否可用于該實驗。 | 1-3周 |
| 8.保證型服務(可選) | 重復前述實驗(雜交瘤制備,抗體純化和檢測實驗。如有必要則重復動物免疫實驗)直至獲得符合要求的抗血清或純化抗體。 | N/A |
動物在SPF條件下飼養
使用耗材和試劑(Corning,Gibco,HyClone或具有同等質量的品牌)
您將收獲:
實驗報告和鑒定/驗證報告
陽性雜交瘤上清(用于客戶鑒定和挑選)
3株陽性細胞株亞克隆(或選擇直接陽性克隆擴大培養)
純化的高特異性與高親和性的小鼠源單克隆抗體





